Технология искусственного выращивания молоди стерляди в условиях ЮФ ФСГРЦ

 

Министерство образования и науки Российской Федерации

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Кафедра водных биоресурсов и аквакультуры










ДИПЛОМНАЯ РАБОТА

ТЕХНОЛОГИЯ ИСКУССТВЕННОГО ВЫРАЩИВАНИЯ МОЛОДИ СТЕРЛЯДИ В УСЛОВИЯХ ЮФ ФСГРЦ



Работу выполнил М.В Христиченко

Нормоконтролёр, Н.Г. Пашинова






Краснодар 2012


РЕФЕРАТ


Дипломная работа выполнена на 54 страниц, содержит 10 таблиц, 19 рисунков, 32 литературных источника.

Ключевые слова: КРАСНОДАРСКИЙ КРАЙ, СТЕРЛЯДЬ, ГИПОФИЗАРНЫЕ ИНЬЕКЦИИ, МАТОЧНОЕ СТАДО, ИНКУБАЦИЯ, ПОДРАЩИВАНИЕ МОЛОДИ, РЫБОВОДСТВО, ПИТАНИЕ.

При инъецировании самок стерляди сурфагоном крайне низкий шанс получить пригодную к оплодотворению икру.

При кормлении молоди стерляди рационом с повышенным содержанием живых кормов молодь набирает массу быстрее, чем контрольная группа, но далее следует высокий отход в опытной группе.


СОДЕРЖАНИЕ


Реферат

Введение

. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕРЛЯДИ

1.1 Систематическое положение и географическое распространение объекта исследования

2. Описание района исследования

. Методы и материалы

3.1 Общие методы

4. Технологический процесс искусственного воспроизводства стерляди

4.1Монтаж оборудования и его подготовка к работе

.2 Результаты оплодотворения

.3 Результаты инкубации стерляди

.4 Выращивание молоди в бассейнах

Выводы и рекомендации

Литература


ВВЕДЕНИЕ


Осетровые рыбы (стерлядь, бестер, русский и сибирский осетр) обладают высокой адаптационной пластичностью и при выращивании в садках хорошо используют корма и дают высокий экономический эффект при выращивании.

Стерлядь один из немногих представителей осетровых, постоянно обитающих в пресных водах. Производителей стерляди для садковых хозяйств получают в местах ее промысла - в реках Каспийского, Азово-Черноморского бассейнов, в бассейнах рек Сибири, северо-запада и европейского Севера (Горский, Яржомбек, 2003).

Учитывая, что стерлядь самый скороспелый вид, она является самым популярным объектом для получения межвидовых гибридов (Мильштейн, 1982). В приплотинном участке нижнего бьефа Краснодарского водохранилища, в 2001 г. была поймана самка стерляди длиной 92 см и массой 5,6 кг с гонадами IV стадии зрелости. Самцы созревают в возрасте двух лет. Это свидетельствует о том, что стерлядь в р. Кубань отличается наиболее высоким темпом роста и ранним половым созреванием во всем ареале обитания (Чебанов, Козырицкая, 2007).

Ранее стерлядь обитала в р. Кубани, но численность ее была невелика. Встречалась в реке от устья до ст. Тбилисской. Последний случай поимки стерляди в р. Кубань (до ее реакклиматизации) относится к 40-м годам прошлого столетия. В 1998 г. были начаты работы по реакклиматизация стерляди в Краснодарском водохранилище из маточного стада ЮФ ФСГЦР (Березовская и др., 1999). В период с 1998-2005 г.г. стерлядь расселилась по всей акватории водохранилища и значительной части р. Кубань. Поднимается в верховья р. Кубань (до г. Кропоткина и Невинномысска) и скатывается в низовья (встречается в устьях Кубани и Протоки). Популяция стерляди, формируемая в бассейне р. Кубани, является самой южной во всем ареале обитания этого вида.

Восстановлению прежней численности вида в данном ареале препятствуют зарегулирование и браконьерский вылов, загрязнение рек промышленными, сельскохозяйственными и бытовыми стоками, обмеление рек.

Популяция стерляди р. Кубань внесена в Красную книгу Российской Федерации (2001), категория 1 - отдельные популяции широко распространенного вида, находящиеся под угрозой исчезновения. Популяция стерляди р. Кубани внесена в Красную книгу Краснодарского края - региональная популяция относится к категории 1А «Находящийся в критическом состоянии» 1а, КС.

В связи с антропологическими факторами остро встаёт проблема восполнения естественных популяций стерляди. Один из способов её выхода из кризисной ситуации - это искусственное воспроизведение молоди стерляди, подращивание её в бассейнах до жизнестойких стадий и дальнейшее зарыбление естественных водоёмов.

Объект исследования - маточное стадо, икра и молодь стерляди с осетрового хозяйства на территории муниципального предприятия "Живая рыба" на реке Читук. Целью работы было изучение технологического процесса получения и подращивания молоди стерляди в условиях индустриального выращивания.

Задачей исследования являлось:

Изучение литературных данных по теме работы;

.изучение темпов роста молоди стерляди;

.контроль над режимом кормления;

.наблюдение за условиями выращивания;

.оценка результатов выращивания молоди стерляди.


1. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕРЛЯДИ


.1Систематическое положение и географическое распространение объекта исследования


Acipenser ruthenus Linnaeus, 1758: 237 (Волга, реки России).pygmaeus Pallas, 1814: 102.kamensis Lovetsky, 1834: 262.gmelini Fitzinger et Heckel, 1836: 276 (реки Сибири).ruthenus - Берг, 1911: 200.ruthenus marsilii - Меньшиков, 1937: 72 (Иртыш, Ангара).primigenius Чаликов, 1944: 47 (Каспий).ruzskyi Иоганзен, 1946: 171 (Обь).ruzskyi n. baschmakovae Иоганзен, 1946: 173 (Обь).ruthenus m. kamensis - Берг, 1948: 71 (тупорылая форма).ruthenus ruthenus n. marsiglii - Берг, 1948: 76 (реки Сибири).ruthenus - Sokolov et Vasil'ev, 1989: 227; - Аннотированный каталог,1998:21; - Атлас пресноводных рыб России, 2002: 46 (ареал).marsiglii Brandt in: Brandt et Ratzeburg, 1833: 352 (Обь, реки Сибири).

Стерлядь (Acipenser ruthenus (рисунок 1)). Рыба семейства осетровых. Длина 40-60 см, масса 0,1-1 кг, может достигать 125 см и 16 кг. Тело вытянутое, веретенообразное. Скелет хрящевой. Спинной плавник далеко отставлен назад, в нём 39-49 лучей, а анальном 20-30 лучей. Позвоночник далеко входит в более длинную верхнюю лопасть хвостового плавника. Грудные и брюшные плавники относительно длинные, массивные. У основания их, как правило, мощная жировая подушка. Вдоль тела в 5 рядов расположены массивные костные пластинки-жучки (12-16 спинных, 58-71 боковых, 12-16 брюшных), которые у крупных рыб уменьшены. Между рядами жучек многочисленные мелкие костные пластинки с мелкими шипиками, придающими поверхности острую шероховатость.


Рисунок 1 - стерлядь (Acipenser ruthenus).


Голова, боковые поверхности жаберных крышек, грудь и основание грудных плавников покрыты многочисленными крупными плотными костными пластинками. Жаберные крышки приращены к межжаберному промежутку, плотно прикрывая жаберные отверстия. Между глазом и верхним краем жаберной крышки имеется небольшое отверстие (брызгальце), свойственное только осетровым рыбам. Рыло обычно удлинённое, заостренное, слегка уплощенное и приподнятое на конце (встречаются и тупорылые формы). Щелевидный, слегка круглый рот на нижней стороне головы, окаймлён мясистыми губами, может выдвигаться наружу. Впереди рта 4 цилиндрических бахромчатых усика (#"justify">Среди осетровых стерлядь - единственная сугубо пресноводная рыба. Стерлядь очень широко распространена (Рисунок 2) в водах бывшего Советского Союза, и встречалась в реках Черного, Азовского (рисунок 3), Каспийского и Балтийского морей. В конце 18 - начале 19 в. (возможно и раньше ) по системе каналов стерлядь проникала по системе каналов в Северную Двину. Водилась раньше в Онежском и Ладожском озерах. Встречается в крупных реках Сибири - Оби, Иртыше и Енисее, где представлена самостоятельным подвидом - сибирской стерлядью (Acipenser ruthenus marsiglii).


Рисунок 2 - Распространение стерляди.


Рисунок 3 - Карта-схема мест обитания и искусственного воспроизводства стерляди в Азово-Кубанском районе.


Далее на восток (Пясина, Хатанга, Лена, Колыма) отсутствует. Основные стерляжьи реки - Волга с притоками, Дон, Обь с Иртышем. Стерлядь пересаживали во многие водоемы: Печору, Западную Двину, Мезень, Неман, Амур, но не везде она прижилась.

Стерлядь типичная пресноводная рыба, но в бассейне Волги в небольшом количестве встречается и крупная полупроходная форма (средния длина самок 74 см. и масса 2,8 кг.), которая нагуливается на богатых пастбищах Северного Каспия, а на нерест подымается не далеко по реке. Эта форма стерляди даже была выделена в самостоятельный вид (Acipenser primigenius). Существование крупной полупроходной, быстрорастущей стерляди в Волге ( а, возможно, и в других наших южных реках) подтверждается и археологическими материалами.

Окраска стерляди довольно изменчива и в зависимости от условий обитания бывает то темнее, то светлее (рисунок 1): в целом спина этой рыбы, как правило, темновато-бурая, брюхо желтоватое или беловатое, плавники серые (Гершанович, Пегасов, Шатуновский, 1987).

Стерлядь обитает на самых глубоких участках рек, относится к числу стайных придонных рыб. Обычными местами её обитания являются проточные ямы с песчаным или галечным дном. Поздно вечером и ночью стерлядь может подниматься к поверхности и, плавая вверх брюшком, выходить на мелкие места и в заросли, где находит обильное питание, однако ведёт себя здесь она очень осторожно и при опасности уходит на глубину.

Весной интенсивный ход стерляди вверх по течению продолжается около 4-5 недель, пока паводковые воды не пойдут на убыль. За это время стерлядь достигает мест с удобными нерестилищами и летних мест обитания. Замечено, что в сильное половодье стерлядь поднимается в верхние участки рек значительно дальше и в большем количестве, чем в годы со слабыми разливами. Предполагают, что именно значительное уменьшение уровней паводковых вод, прогрессирующее обмеление и зарегулирование стока многих рек ухудшило условия воспроизводства стерляди и привело к почти полному её исчезновению (Строганов, 1968).

Размножение и развитие молоди. Самцы стерляди достигают половой зрелости в возрасте 4-5 лет при длине тела около 30 см, самки - в 6-7 лет при длине тела более 40 см. Абсолютная плодовитость самок составляет от 11 до 140 тысяч икринок. Нерестится стерлядь на большой глубине, при самом высоком уровне паводковых вод, когда температура воды поднимается выше 10 С°, что обычно бывает во 2-й половине апреля - начале мая и совпадает с периодом цветения садов. Икрометание у молодых особей бывает ежегодно, в старших возрастах через 2 года. Длится оно около 2 недель. Каждый самец оплодотворяет, по-видимому, икру нескольких самок и задерживается на месте нереста дольше, чем самки. Икринки стерляди очень клейкие и прочно прикрепляются к субстрату. Через 6-9 дней из них выклёвываются личинки (рисунок 4), которые около 10-14 дней питаются за счёт желточного мешка, а позже переходят на питание мелкими животными организмами.

Мальки первое время держатся вблизи нерестилищ, укрывшись от быстрого течения за камнями и в углублениях дна, и лишь позже начинают выходить на илистые места, где находят обильное питание.

Темп роста стерляди по сравнению с другими рыбами довольно высок - к осени молодь достигает длины 15-20 см, к 2 годам -26-28 см, в дальнейшем ежегодный прирост составляет около 4-5 см. Существенной разницы в росте самок и самцов нет.

Сразу же после нереста стерлядь устремляется в пойменные заливные участки, озёра и старицы, к берегам рек, где в зарослях находит мелких водных животных, личинок насекомых, червей, изобилующих в это время на залитой вешними водами пойме. Прожорливость стерляди в это время исключительно велика. По мере спада паводковых вод стерлядь вновь входит в русла рек и уже в начале лета начинает постепенно скатываться вниз по течению. Скат идёт медленно; по ночам рыбы заходят в заливы, на песчаные отмели и продолжают усиленно кормиться ракообразными, личинками водных насекомых, собираемыми на дне водоёма, затонувших корягах и бревнах. Днём стерлядь придерживается глубоких омутов и ям в русле реки. Глубокой осенью их стаи концентрируются на нижних участках рек, где большую часть зимы проводят в малоподвижном состоянии. Как и у многих других рыб, физиологические процессы у стерляди зимой замедляются, питание сводится к минимуму и рыбы впадают в состояние оцепенения (Горский, Яржомбек, 2003).


Рисунок 4 - Стадии личиночного развития.


а-предличинка( ст 39, длина тела 12-13 мм); б-предличинка ( ст 40, длина тела 13 мм); в-предличинка ( ст 41, длина тела 14 мм); г-предличинка ( ст42, длина тела 15 мм); д-предличинка ( ст 43, длина тела 16 мм); е-предличинка ( ст 44, длина тела 17 мм); ж-личинка, перешедшая на активное экзогенное питание ( ст 45, длина тела 17-18мм).

Состояние запасов. Этот вид - традиционный и давний объект прудового выращивания. В 1971 году под Москвой впервые удалось получить потомство от производителей стерляди, выращенных в садках, установленных в водохранилище, а позднее была получена икра и молодь от рыб, содержавшихся в тепловодном хозяйстве при ГРЭС.

В середине ХХ века на территории Краснодарского края и республики Адыгея был создан мощный водохозяйственный ирригационный комплекс для удовлетворения, в основном, биотехнических потребностей ведущей отрасли материального производства региона - сельского хозяйства и его подотрасли - рисоводства, производящей 80% валового производства риса в России. Одновременно в Ставрополье создавался водохозяйственный комплекс с изъятием речного стока Верхней Кубани, достигшим к началу 90-х годов - 2,9 км3. В настоящее время ежегодное безвозвратное изъятие стока Кубани составляет около 7 км3, что почти в 3 раза превышает предельно допустимые экологические нормы (2,6 км3 (Чебанов, 1996)).

Входящие в водохозяйственный комплекс, построенные русловые плотины на нерестовых реках Азово-Кубанского района, мощные водозаборы с насосными станциями оросительных рисовых систем, рыбозащитные и рыбопропускные сооружения, а также загрязнение водоёмов пестицидами, нефтепродуктами, солями тяжёлых металлов привели к полному прекращению естественного размножения осетровых? В число которых входит стерлядь (Chebanov at al., 2002).

В целом основные гидрологические показатели (скорости течения, глубины, прозрачность) на нерестилищах Верхней Кубани и притоках практически не изменились и потенциально пригодны для размножения стерляди, однако окончательный вывод о пригодности их для нереста можно сделать только после проведения современной инвентаризации.


2. ОПИСАНИЕ РАЙОНА ИССЛЕДОВАНИЙ


Работы по получению половых продуктов, инкубации икры, подращиванию личинок и молоди проводились в инкубационных цехах специализированного рыборазводного завода растительноядных рыб, которых находится в Республике Адыгея, аул Тугургой. Предприятие введено в эксплуатацию в 1975 г. с проектной мощностью 250 млн. личинок растительноядных рыб в год. Статус «племенного хозяйства» рыбопитомник получил в 2000 г. В 2005 г. получены лицензии ПЖ-77 № 003592 от 03.06.05 г., регистрационный номер 608, на племенное разведение белого и пестрого толстолобиков, ПЖ-77 № 003595 от 03.06.05 г., регистрационный номер 607, на племенное разведение белого амура. В хозяйстве также разводятся белый амур, веслонос, гибрид русско-ленского осетра и экспериментальное стадо гибридного толстолобика с увеличенным числом жаберных тычинок.

Природно-климатическая характеристика региона такова: шестая зона рыбоводства, число дней со среднесуточной температурой выше +15°С - 135, выше +10°С - около 175 дней, сумма активных температур выше 10°С за год составляет 3400 градусо-дней, средняя температура воздуха в мае-августе 21-23°С, в ноябре-марте около -4°С. За год выпадает 450-530 мм осадков.

Характеристика земель, отведенных хозяйству следующая: общий земельный фонд - 620,4 га. В том числе: водный фонд - 431 га, производственные постройки - 164,5 га, площади под сельскохозяйственными культурами, садами и др. - 23 га.

Категория хозяйства - рыбопитомник с селекционно-племенным участком по разведению растительноядных рыб. Тип хозяйства - прудовое. Основное направление хозяйственной деятельности - производство племенного рыбопосадочного материала растительноядных рыб и веслоноса, товарная рыбы растительноядных пород (толстолобик белый/пестрый, белый амур).

Водоисточник - Краснодарское водохранилище. Объем используемой воды 8,2 млн м3 в год. Подача воды осуществляется самотеком. Ветеринарно-санитарное состояние - благополучное. Хозяйство свободно от инфекционных и инвазионных заболеваний (справка территориального органа ветеринарии Республики Адыгея).

Температурный режим Краснодарского водохранилища формируется под влиянием климатических условий года, объема и характерных особенностей протекаемых в водохранилище вод р.Кубань и её притоков.

По средним многолетним данным, в водохранилище нерестовые температуры для стерляди 7-10,5о согласно (Берг, Богданов, Кожин и др., 1949) наступают в апреле, вероятно, и в конце марта. Температурный максимум бывает в июле-августе. Осенью и весной устанавливается гомотермия, летом прямая и зимой обратная стратификация, устойчивость которой характерна для центральной речной и глубоководной (приплотинной) зон водохранилища.

Исследования КрасНИИРХ (Москул, 1994) показали, что разница температур летом в безветренные дни поверхностного и придонного слоёв в приплотинной зоне составляет 5-7оС, а январе и феврале температура нижних слоёв на 2-3оС выше температуры верхних.

По температурному режиму Краснодарское водохранилище относится к хорошо прогреваемым водоемам умеренной зоны, что определяет его высокие потенциальные возможности в продуцировании биоресурсов, и, в частности, по обеспечению успешного воспроизводства, нагула и зимовки стерляди.

Газовый режим. Содержание растворенного в воде кислорода в водохранилище подвержено значительным колебаниям, связанным с сезонностью, температурным режимом, цветением водорослей, загрязнением, локальными особенностями и другими факторами. В зоне стокового течения Кубани осенью содержание растворенного в воде кислорода увеличивалось до 121% насыщения.

Зимой величина насыщения воды кислородом сохраняется высокой до ледостава, при наступлении последнего она снижается до 55-62%.

Минимальное содержание кислорода наблюдалось в придонных слоях приплотинной и центральной зон водохранилища, в летний период до 45-48% насыщения.

Содержание свободной углекислоты в максимальных показателях отмечалось в северной и восточной частях водохранилища (13 мг/л), минимальное (5 мг/л) в устьевых участках рек Белая, Псекупс, Пшиш. Летом при высокой температуре содержание углекислоты на мелководье возрастало до 16-18 мг/л.

Концентрация водородных ионов (рН) в течение сезона больших колебаний не имела. По данным (Москул, 1994), с 1976 по 1991 гг. средние показатели рН колебались от 7,85 до 8,08.

Окисляемость составляла в среднем за период наблюдений (1976-1991 гг.) 7-12 мгО/л, без существенных колебаний по сезонам, биотопам и глубинам.

Минеральный состав воды водохранилища малоизменчив. Характеризуется преобладанием гидрокарбонатных (НСО3-) и сульфатных (SO42-) ионов (68%). По О.А.Алекину вода относится к гидрокарбонатно-сульфатному типу II класса.

Характеристика загрязнения Краснодарского водохранилища. По данным (Чебанов, Березовская и др.1995) качество воды Краснодарского водохранилища не соответствует санитарным требованиям и оценивается как загрязненная. (СанПИН № 46 30-85). Индекс загрязненности за 1987 г. составил 2,27. БПК5 превышает ПДК в 3-6 раз, нефтепродукты - 14 ПДК и выше, содержание меди - до 6-8 ПДК, азота нитритного - до 12 ПДК. Отмечается эпизодическое наличие ХОС и ФОС, рисовых пестицидов с концентрацией, превышающей ПДК.

Краснодарское водохранилище подвержено эвтрофикации. При допустимой нагрузке лимитирующего в процессе эвтрофикации элемента-фосфора 180 т/год (критический - 400 т/год), фактический показатель составил 272, 5 т, т.е. выше допустимого в 1,5 раза. Имело место массовое развитие синезеленых и эвгленовых водорослей. В последние годы санитарное состояние водохранилища улучшилось.

Для улучшения экологического состояния водохранилища разработаны мероприятия по улучшению качества воды в нем, повышению эффективности его рыбохозяйственного использования, намечается снижение смыва с полей пестицидов и биогенных веществ на 10-25%.

В сравнении с водохранилищами волжского каскада, в которых обитает стерлядь, Краснодарское водохранилище по показателям загрязнения находится, можно считать, в одинаковом положении с ними.


Рисунок 5. Географическое положение завода растительноядных рыб. Кругом обозначено место расположения завода.


Маточное стадо содержится на прудах муниципального предприятия "Живая рыба", которое работает в городе Адыгейск с 1999 года, занимаясь последние 6 лет выращиванием осетровых. Водоисточник - Краснодарское водохранилище, Теучежский район, р. Кубань на 242 км ниже устья. Сброс: Теучежский район, р. Кубань на 240 км ниже устья.

3. МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ


.1 Общие методы


В данной работе приведены данные по изучению воспроизводства в заводских условиях стерляди, полученной от маточного стада, которое содержат в прудах муниципального предприятия "Живая рыба". Работа была выполнена с 01 мая 2011 года по 5 июля 2011. Изучались биотические и абиотические факторы среды, болезни, сопутствующие данному техпроцессу разведения, процент оплодотворения и выклева икры, переход личинки на активное питание и её темпы роста.

Масса тела молоди и икры измерялась в граммах, определялась с помощью электронных весов. Погрешность измерения составляла 00,5 г. Икринки помещались в тару, взвешивались и потом считалось сколько в грамме икринок.

Также производился расчёт средних значений каждого показателя, минимальное и максимальное значение всех показателей, а также ошибки среднего значения. Вычисления проводились с помощью стандартных статистических методов (Лакин, 1973).

Расчёт средних значений () производился по формуле:


=


где - сумма вариант; xi - отдельно взятый признак; n - количество особей.

Стандартное отклонение (?) находилось по формуле:


? =


где - сумма квадратов отклонений от средней величины.

Ошибка среднего значения (m) находилась по формуле:


m =


Температура воды измерялась спиртовым термометром.

Темп роста измерялся выловом рыбы из бассейнов раз в 7 дней. Аэрирование бассейнов обеспечивалось с помощью флейт.

Садки, в которых зимовало маточное стадо - это участки поделённого на сектора пруда площадью по 450 м2.

Для обесклеивания использовались аппараты Вейса. Для инкубации икры использовался аппарат «осётр». Для выращивания молоди использовался бассейн ИЦА-2.

Для дезинфекции использовались растворы метиленового синего, бриллиантового и малахитового зелёных. Для борьбы с сапролегнией использовался препарат Сера Микопур.

Для стимуляции гипофиза использовался натуральный гипофиз осетровых рыб, предварительно проацетилированный.

Для узи-диагностики использовался портативный узи-сканер с линейным датчиком.

Инкубационный аппарат «Осётр» (рисунок 6) предназначен для инкубации оплодотворенной обесклееной икры осетровых. Принцип работы аппарата основан на постоянной омываемости водой оплодотворенной обесклеенной икры осетровых рыб, помещенной в инкубационные ящики, благодаря импульсной подаче воды. Инкубационная икра (выклев личинок) в инкубационных ящиках длится около девяти суток для стерляди. Продолжительность инкубации на каждом рыбоводном предприятии устанавливается опытным путем в соответствии с используемым технологическим процессом.


Рисунок 6 - Аппарат «Осётр» в сборе (слева) и одиночный модульный ящик (справа).


Технические характеристики:

Количество загружаемой в аппарат икры, кг…………..40

Количество инкубационных ящиков шт………………16

Расход воды, куб.м/ч ………………………………...4,8

Продолжительность инкубационного периода, сутки ……9

Габаритные размеры, мм…………….3200 х 1660 х 1500

Сухая масса аппарата, кг……………………….450

Аппарат Вейса используют для обесклеивания икры осетровых и в некоторых случаях используется как инкубационный аппарат (рисунок 7). Ёмкость аппарата - 30 литров. Токи воды, идущие из водопроводного крана, поступают под напором в нижнюю часть сосуда и поднимают вверх помещенную в аппарат икру. Аналогично если вместо воды - воздух. В верхней части сосуда напор воды или барбатаж воздуха ослабевает, поэтому икринки начинают постепенно опускаться в нижнюю часть его, где подхватываются струями воды и вновь увлекаются вверх. Таким образом, на протяжении всего периода инкубации икра находится в непрерывном движении в толще воды. Расход воды в аппарате - 3-4 л/мин.


Рисунок 7 - Аппараты Вейса в стойке (слева) и одиночная колба с икрой без барботажа (справа).


Бассейн стеклопластиковый ИЦА-2. Размер 2100 х 2100 мм, высота с ножками - 1150 мм, глубина чаши - 750 мм. Вес 85 кг, площадь дна 4 м2, объем 3,0 м3. Оборудован донным сливом диаметр 110 мм и грязесборником 300 х300 глубиной 50 мм. Бассейн (рисунок 8) предназначен для подращивания мальков и выращивания молоди осетра, форели, гольца, судака и др. видов рыб в течение первого года жизни. Бассейн углепластиковый, а значит требует бережного отношения и также не допускается деформация его при переноске, иначе ёмкость даст течь.

Грязесборник (синонимы - «колено», «гусак») подвижно вращается вокруг оси короткого конца, что позволяет регулировать уровень воды в бассейне и также удалять грязь со дна.


Рисунок 8 - Бассейн ИЦА-2.


4. ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС ИСКУССТВЕННОГО ВОСПРОИЗВОДСТВА СТЕРЛЯДИ


.1 Монтаж оборудования и его подготовка к работе


Биотехнический процесс воспроизводства стерляди начинается с обустройства цеха необходимыми аппаратами. В цеху были смонтированы рыбоводные модули: аппараты Вейса для обесклеивания икры, воздуходувка (компрессор), аппараты «Осётр», бассейны для выращивания личинок и молоди ИЦА-2. Оборудование размещено в цеху для удобной логистики, подключено к источникам воды и сливам, проверено на работоспособность и отказоустойчивость. Затем обработано дезинфицирующими растворами. Наиболее популярны органические красители. На рисунке 6 схематично показано размещение производителей стерляди в бассейнах ИЦА-2 внутри инкубационного цеха.


Рисунок 9 - Схема инкубационного цеха.


1 - ИЦА-2 с самцами, 2 - ИЦА-2 с самками, 3 - вспомогательные бассейны передержки, 4 - аппарат «осётр», 5 - операционный стол, 6 - лабораторный стол, 7 - аппараты Вейса, 8 - уголок дежурного рыбовода, 9 - мальковые бассейны.

Аппарат «Осётр» мы запустили в «холостом» режиме для калибровки поплавков; количество качков должно быть от 5 до 8 в минутe. В таком режиме «Осётр» работал сутки.

Все аппараты были обработаны крепкими растворами органических красителей. Затем оставили оборудование на сутки заполненными растворами.


.2 Результаты оплодотворения икры стерляди


В Южном Филиале селекционно-генетического центра рыбоводства (ЮФ ФСГЦР) сформировано крупнейшее в России гетерогенное маточное стадо стерляди (только в 2007 г. - в продуктивной части стада содержалось около 4,5 тыс. зрелых самок).

Ремонтно-маточные стада стерляди имеются практически на всех осетроводных хозяйствах и осетровых рыбоводных заводах Краснодарского края. Основой формирования этих стад стала оплодотворенная икра и личинки, полученные от ЮФ ФСГЦР. В свою очередь исходным материалом для формирования ремонтно-маточного стада стерляди в ЮФ ФСГЦР послужили живая икра и предличинки (в возрасте 1-3 сут.), завезенные из различных регионов России в период с 1993 г по 2001 год (таблица 1).

Для определения количества производителей, необходимых для нерестовой компании мы использовали формулу эффективной численности. Исходя из неё, можно считать, что группа из 150-250 особей (в зависимости от рабочей плодовитости) может быть необходимым и достаточным носителем генофонда конкретной популяции в неволе, особенно учитывая высокую индивидуальную плодовитость рыб, которая обеспечит потенциально более широкий генофонд по сравнению (Ананьев и др.,1999), например, с группой такой же численности млекопитающих или птиц.


Таблица 1 - Источники формирования живой генетической коллекции стерляди ЮФ ФСГЦР.

Место завозаИсточник формирования маточного стадаПТРХ Тольяттинской ТЭЦСредняя Волга Куйбышевское вдхр.ПТРХ Тольяттинской ТЭЦНижняя КамаПРВХ "Ставропольский"Нижняя Волга, г. ВолгоградОАО "Волгореченскрыбхоз"Нижняя Волга, г. Волгоград Верхняя Волга, г. КостромаРВХ Пермской ГРЭСзавезена из ОАО "Волгореченскрыбхоз"Абалакский ОРЗр. Иртыш, г. ТобольскАО "Кармановский рыбхоз"бассейн р. Кама, р. Белая

Рисунок 10 - Стерлядь из живой генетической коллекции ЮФ ФСГЦР.


К настоящему времени ремонтно-маточное стадо стерляди ЮФ ФСГЦР стерляди представлено 5-ю популяционными группами с более чем десятью возрастными группами в каждой.

Стерлядь инъецировали по схеме дробных инъекций, при которых доза препарата делится на равные части, вводимые рыбе через определенные промежутки времени. При такой схеме последняя инъекция называется разрешающей, а все остальные предварительными.


Таблица 2 - Количество единиц ремонтно-маточного стада, прошедшие весеннюю бонитировку и участвовавшие в нерестовой компании 2011 г.

ВидКатегорияВозраст, летКоличествоСамкиСамцыСтерлядьпроизводители5-7 и более260166Ответившие на инъекцию:246158

Иногда в схеме дробных инъекций предусмотрено введение дополнительной дозы препарата после разрешающей инъекции. Эта доза называется завершающей и применяется когда необходимо увеличить концентрацию препарата в крови после начала действия разрешающей инъекции. Такую инъекцию вводили несозревшим вовремя самкам.

Из (таблицы 2) видно, что не все производители ответили на гонадотропные инъекции. Среди производителей, отобранных при весенней бонитировке по брачному наряду и УЗИ-сканированием как правило встречается особи, которых приходится либо исключать из нерестовой компании либо дополнительно выдерживать длительное время при определённых температурах, но икру они дадут неудовлетворительного качества для воспроизведения. Годится такая икра только для пищевого употребления.

При применении метода дробных инъекций сначала вводили очень небольшие дозы гипофиза, ускоряющие поляризацию ооцитов и переход гонад в IV-ой завершённую стадию зрелости, а спустя 24 ч вводили большую дозу гормона, которая завершает созревание и вызывает овуляцию ооцитов.

При двукратной схеме инъецирования наибольшее затруднение вызвал подбор начальной дозы гипофиза, стимулирующей завершение первых фаз развития ооцитов и переход их в фазы созревания: концентрацию ядрышек в ядре, движение ядра в сторону микропиле. Если к моменту введения первой дозы хромосомы и ядрышки уже сконцентрированы в центре ядра, такие ооциты завершают фазы развития, то есть проходят мейотические фазы деления и даже достигают предовуляционного состояния или метафазы второго деления созревания. При этом завышенные дозы при первой инъекции вызывают нарушения в прохождении указанных преобразований ядра в ооцитах, что задерживает созревание икры после второй дозы, либо вовсе делает невозможной её овуляцию.

Правильный выбор дозировки при первой инъекции имеет даже большее значение, чем при второй. Применение дозировок гипофиза без учёта коэффициента поляризации не всегда приводит к положительным результатам, величина оплодотворяемости икры колеблется в больших пределах, наблюдается асинхронность в созревании самок после разрешающей инъекции. В процессе работы эмпирически была выявлена закономерность в подборе первой дозы гипофиза в зависимости от коэффициента поляризации ядра. Установлено, что пресноводные осетровые хуже реагируют на синтетические гормональные препараты (нерестин, сурфагон, Ovopel, GnRH) и гораздо лучше откликаются на инъекции раствора гипофиза осетровых рыб. Поэтому стерлядь в подавляющем большинстве случаев была инъецирована чистым гипофизом осетровых дробным способом.

При устойчивой температуре (10-11 °С) производителей инъецировали из расчета: 1-2 мг гипофиза - предварительная и 10-12 мг гипофиза на 1 кг рыбы - разрешающая инъекция. Через 1 день самки созрели, что было установлено визуально по отдельно рассеянным по дну лотка икринкам или путем осторожного отцеживания малых порций икры (самок просматривали через каждые 1,5-2 ч). Не созревших самок оставляли в бассейнах до следующего утра.

В отличие от гипофизарных препаратов, релизинг-гормоны не повреждают ооциты даже при 400-кратном превышении доз (Гончаров, 1998). Препараты могут вводиться единовременно, дробно или градуально. Наиболее эффективен «Сурфагон» при работе с самками проходных видов - севрюги, русского осетра и белуги, и самцами всех видов, для которых оптимальной дозой является 1 мкг/кг. Для стерляди и ленского сибирского осетра препарат менее эффективен, однако в случае отсутствия гипофизарных препаратов при оптимальной нерестовой температуре его можно применять, однако дозировки в этом случае следует увеличить.

При инъецированные производителей стерляди кроме чистого гипофиза были также использованы растворы сурфагона в качестве эксперимента. Дозировка подбиралась аналогично гипофизной для данного вида рыбы. Из 14 самок не одна не ответила на инъекцию.

Общие рекомендации по инъецированию. Для инъекций использовали обычные одноразовые медицинские шприцы. Длину иглы и объем шприца подбирали в зависимости от размера рыбы и дозы препарата. Диаметр иглы зависит от того, какой препарат вводится. При использовании ацетонированных гипофизов необходимо использовать иглы для внутривенных инъекций (большего диаметра). Хорошие производители при правильно подобранных дозах инъекций созревали синхронно. Несозревших в течение рабочего дня самок оставляли в цеху

При приготовлении раствора ГГП и суспензии ацетонированного гипофиза необходимо, чтобы объем готового препарата для рыб массой до 5 кг не превышал 2 мл. Инъекцию производили в спинную мышцу между спинными и боковыми жучками на уровне 2-4 спинной жучки. Следует соблюдать осторожность при введении препаратов в мышечные ткани, следить, чтобы рыба при сжатии мышц не вытолкнула препарат. При инъекции препарат не должен вводиться подкожно, нельзя допускать попадания иглы и препарата в жировые ткани. Опасно также слишком глубокое введение иглы (можно повредить спинной мозг или крупные сосуды). Если одной рыбе производили 2 инъекции, вторую инъекцию делали в другую сторону спины, чтобы избежать потерь препарата через отверстие, оставшееся после первой инъекции. После инъекций шприцы и иглы мыли чистой теплой водой и хранили сухими. Специальной дезинфекции не требовалось. Для приготовления суспензии ацетонированных гипофизов применяли медицинский физиологический раствор (Детлаф и др, 1984). Этот же раствор использовали и для разбавления сурфагона, в случае если необходимо снизить его концентрацию. Не следует хранить разбавленные препараты и приготовленную суспензию, все препараты приготовлялись и набирались в шприцы непосредственно перед инъекциями.

Есть ещё один способ инъецирования осетровых. Достаточно спустить воду в бассейне до такого уровня, чтобы была видна спина рыбы. При должной сноровке и опыте можно поймать момент, когда рыба движется в толще воды и сделать укол в спину, при этом надо, без промедления, выдавить поршень и оставить шприц в спине рыбы. Это препятствует вытеканию препарата из раны и служит своеобразной меткой для уже инъецированных рыб: одной рыбе не сделают два укола. Также нет необходимости подвергать животное стрессу, доставая его из воды. Чем больше рыба, тем спокойней она относится к уколу (это объясняется закономерностью: чем больше животное, тем выше его болевой порог), иногда даже не меняя поведения при инъекции. Через несколько минут следует изъять из рыб шприцы для дезинфекции (рисунок 12) и повысить уровень воды до прежней отметки.


Рисунок 11 - Шприцы с раствором гипофиза (слева) и их стерилизация (справа).


Доза для самцов была в два раза меньше, чем для самок (таблица 5), а инъекции производились одновременно с предварительной инъекцией самкам. В начале и в конце сезона, при пограничных нерестовых температурах самцов инъецируют также градуально, снизив относительные дозировки на 25-50% относительно самок.

На последнем этапе созревания вместе с овариальной жидкостью вытекает икра (количество икринок может быть как очень малым, так и значительным). Вытекание большой порции икры при просмотре самки в этот период часто служит причиной преждевременного забоя заводским методом или неудачных попыток отбора икры прижизненными методами;

Практически полная овуляция икры сопровождается самопроизвольным ее выбоем, обнаружить который проще, установив на сливные гусаки бассейнов сито из полимерной или металлической сетки с размером ячеи около 1 мм. При надавливании на заднюю часть брюшка или сгибании рыбы наблюдается струя икры. Вместе с тем давление на брюшко или сгибание рыбы может не вызвать выход икры из полового отверстия.

Причиной задержки выхода икры могут являться или «пробка» из склеившихся при попадания в заднюю часть яйцевода воды икринок, или сжатые мышцы (при небольших размерах полового отверстия). Поэтому рекомендуется введение пальца в половое отверстие как для удаления "пробки", так и для снятия мышечных спазмов. Отсутствие сильной струи икры из полового отверстия является частой причиной задержек при взятии икры, что негативно сказывается на ее рыбоводном качестве. Вместе с тем, струя икры при просмотре самки не всегда означает, что большая часть икры овулировала.

При просмотре самок необходимо снизить до минимума стрессирующие рыбу воздействия. Рыб не просматривали раньше наступления расчетного времени. Установка сит на сливные гусаки бассейнов значительно облегчает контроль над созреванием самок. При просмотре самок не следует привлекать лишних людей, не должно быть шума. Свет в помещении горел постоянно.

После размещения производителей в бассейнах стерлядь не кормили и не беспокоили 3 суток. За это время рыба адаптируется к температуре и воде. Бассейны накрывали сеткой, иначе есть риск выпрыгивания рыбы. Не в коем случае не оставляли оставлять цех без присмотра, дежурный постоянно следил за производителями и водоподачей, а позже и за инкубационным аппаратом. На рисунке представлен график температур в период с 1 по 15 мая на момент созревания, инкубации и выклева личинок.


Рисунок 12 - Температурный режим воды в бассейнах.


Процедуру сцеживания икры у каждой самки производили дважды. Перед первым сцеживанием у созревших рыб подрезали яйцевод. При втором сцеживании (через 1-2 часа после первого) изымалась остаточная икра, рыбоводные и технологические качества которой, как правило, хуже, чем в первой порции. Отход самок после получения икры не превышает 1% в год.

Интенсивная эксплуатация самок может приводить к появлению в сцеженной овулировавшей икре включений, которые обычно в ней не встречаются: прошлогодней икры и прозрачных пузыревидных тел с жидким содержимым и хрящевыми включениями. Прошлогодняя икра имеет вид небольших пластинок, образованных сплющенными посветлевшими овулировавшими икринками, которые не были сцежены в предыдущий нерестовый сезон и сохранились в полости тела рыбы, застряв между внутренними органами. Обычно таких икринок немного, и на рыбоводном и технологическом качестве икры новой генерации их присутствие отрицательно не сказывается. Обычно описываемые образования встречаются единично, но у самок через год после принудительного выдавливания неовулировавшей икры они могут появляться в массовом количестве.

Получение овулировавшей икры. При использовании метода Подушки ("надрезания яйцеводов") (Подушка, 1986) самку помещали на специальный наклонный столик, конструкция которого может быть различна, в положении на боку, головой вверх. Через половое отверстие вводили скальпель и делали надрез длиной 1,5-2,5 см в каудальной части стенки одного или обоих яйцеводов, открывая тем самым брюшную полость в ее каудальной части. Через полученный разрез икру сцеживали, аккуратно массируя заднюю треть брюшка. Иногда для поддержания созданного разреза в открытом состоянии приходится прибегать к помощи ручки скальпеля или другого плоского металлического предмета.

После получения икры разрезы не требуется зашивать, а икру через них можно сцеживать в несколько приемов. Этим методом можно получать икру от больших партий самок, так в ЮФ ФСГЦР методом надрезания яйцеводов за один день одним оператором была получена икра от 200 самок стерляди. При сцеживании получение икры происходило без оперативного вмешательства. При данном методе с определенными интервалами сцеживали икру из яйцеводов или чередовали сцеживание с массированием брюшка от хвоста к голове, в результате которого яйцеводы наполнялись очередной порцией икры. Даже при наличии достаточных навыков этим методом сцедить практически всю икру невозможно.

В некоторых случаях абдоминальные поры у самок могут быть настолько велики, что без надреза и дополнительных усилий через них может быть сцежена в 1-2 приема вся овулировавшая икра, как при использовании метода Подушки. К недостаткам данного метода относятся длительность, трудоемкость, ухудшение качества икры в последних порциях и неполное сцеживание. Эта технология не пригодна для получения икры от крупных промышленных партий самок.

Рисунок 13 - Надрезание яйцевода по методу С.Б. Подушки.


Иногда, для упрощения операции отбора икры или избегания массирования брюшка рыбы, которое может негативным образом сказаться на состоянии, как кожных покровов, так и внутренних органов, используют различные приспособления, действующие по принципу вакуумного насоса. Наиболее удобным является хирургический аппарат для отсоса крови (Мальцев, 2002). Однако при использовании подобного оборудования следует производить точную регулировку давления, чтобы избежать повреждения ооцитов. Следует еще раз отметить, что качество полученной икры в первую очередь зависит от точности времени ее отбора.

В период получения и отбора наиболее перспективной икры стерляди в производственном процессе было задействовано 260 самок донской стерляди. Для дальнейшего биотехнологического процесса по воспроизведению годилась не вся икра. Отбор осуществлялся визуально по размеру (отдавалось предпочтение наиболее крупной икре), пигментации, весу (учитывалось количество икринок в грамме). Из 260 самок 14 не ответили на инъекцию сурфагона, из 246 ответивших было получено для техпроцесса 15,0 кг икры. Остальная полученная икра была использована в пищевых целях.

Получение спермы. Для отбора спермы потребовалась ветошь, стандартный набор мужских уретральных катетеров разных размеров из ПХВ или красной резины и пластиковые одноразовые шприцы Жане, количество которых подбиралось по количеству самцов, обычно единовременно используемых при воспроизводстве. Подбирался катетер, плотно входящий в половое отверстие, не повреждая его. Катетер надевался на шприц Жане. Катетер и шприц должны быть сухими и чистыми. Самца фиксировали на боку, брюхом к самому краю столика, накрытого сухой ветошью, одновременно зажимая половое отверстие, чтобы избежать потерь спермы.

Половое отверстие и область вокруг него насухо вытиралась ветошью, конец катетера вводился в половое отверстие так, чтобы конец вошел в один из семяпроводов на 1-3 см, шприц опускался чуть ниже края стола, так чтобы наклонно расположенный катетер от полового отверстия к шприцу не имел петель и изгибов. Очень медленно отводили поршень шприца, набирая сперму, наблюдая, чтобы катетер не присасывался к стенкам семяпровода, т.к. это может их повредить и привести к попаданию крови в сперму. Важно не допускать хранения спермы от нескольких самцов в одной емкости. В случае попадания в емкость различной спермы оплодотворяющая способность такой смеси резко падает и может быть полностью утрачена за 20-30 мин. Смешивание спермы было осуществлено только непосредственно перед оплодотворением.


Рисунок 14 - Половые продукты перед осеменением.


Следует отметить, что оплодотворение одной самки несколькими самцами в «одном тазу» не обеспечивает должного уровня генетической разнокачественности получаемого потомства, формирование которой особенно важно в условиях ограниченного числа производителей и низкой эффективной численности искусственно формируемой популяции. Причина этого разнокачественность спермы, получаемой от разных самцов. Сперма различных самцов имеет разную активность и концентрацию, в значительной мере зависящие от физиологического состояния самцов, условий преднерестового выдерживания и получения спермы, кратности и времени отбора эякулята. В случае оплодотворения икры от одной самки спермой разного качества велика вероятность преобладания в потомстве особей от одного самца, что неприемлемо при формировании гетерогенного стада или популяции.

Работы, проведенные в Южном филиале ФСГЦР, показали, что для получения генетического разнокачественного потомства осетровых рыб, икру, полученную от одной самки, целесообразно разделять на 3-5 порций, оплодотворяя каждую порцию спермой одного самца, а после оплодотворения ее можно снова соединять, обесклеивая и инкубируя вместе.

После получения спермы оценивали ее качество. В настоящее время используется ряд критериев оценки качества спермы сельскохозяйственных животных, из которых, ввиду технологических особенностей, для осетровых рыб применяют только один - подвижность сперматозоидов по бальной системе (Персов, 1975), оценивающей долю неподвижных и совершающих колебательные движения сперматозоидов, и долю сперматозоидов, совершающих поступательные движения, после добавления в сперму воды. Такой критерий, как концентрация спермы, оценивался «на глаз» и практически не учитывался. Применение показателей скорости движения сперматозоидов и продолжительности их активности не принимались во внимание.

Возможность полиспермного оплодотворения обусловлена наличием у икры осетровых рыб нескольких или многих микропиле. Именно эта особенность и определяла применение «полусухого» (или «русского») способа оплодотворения.

Основной принцип данного способа заключается в том, что в икру добавляли уже раствор спермы в воде, концентрация которого обеспечивает наибольшую вероятность моноспермного оплодотворения. Для достижения необходимой концентрации оптимальное соотношение спермы и воды составляло 1:200. Этот же прием позволял избежать продолжительного пребывания икры в воде без спермы (как при «мокром» способе), т.к. икра сразу попадала в раствор спермы в воде, где очень быстро оплодотворялась.

В процессе оплодотворения важно соотношение икры и оплодотворяющего раствора . Учитывая, что избыток оплодотворяющего раствора при оплодотворении «полусухим» способом не имеет негативных последствий необходимо было обеспечить соотношение икры и раствора, при котором всю смесь было бы легко перемешивать, и обеспечивался контакт всех икринок с оплодотворяющим раствором. Минимальное отношение спермы и икры составляло 10 мл/кг или 2 л оплодотворяющего раствора на 1 кг икры. Вместе с тем, при наличии густой, трудноотделимой овариальной жидкости, крови или частичной резорбции количество оплодотворяющей жидкости увеличивали в 1,5-2,0 раза.


Рисунок 15 - оплодотворение икры стерляди.


Действующие рекомендации определяют время оплодотворения для разных видов осетровых рыб от 3 до 5 минут, обеспечивая максимальную реализацию оплодотворяющего потенциала спермы, вместе с тем практически вся полноценная икра способная к оплодотворению оплодотворяется в течение первых 20-60 секунд. При этом, у части рыб, особенно стерляди, икра приобретает клейкость еще до завершения процедуры оплодотворения, что затрудняет работу. Во многих странах с развитым осетроводством икру осетровых рыб не оплодотворяют дольше 1 минуты.

В процессе получения половых продуктов для осеменения икры участвовало 166 самцов. Из всей спермы, которая была получена, было отобрано 150 мл молок. Отбор осуществляли по шкале подвижности спермиев. Определение активности и времени сохранения подвижности (ВСП) спермиев осуществляли при разбавлении спермы водой, той же в которой были произведены оплодотворение и инкубация икры.

Рисунок 16 - Обесклеивание «голубой глиной» (слева) и промывание (справа)


Обесклеивание икры. Эффективным веществом является «голубая» или вулканическая глина, (Подушка, 1999). «Голубая» глина была испытана на многих рыбоводных хозяйствах и хорошо себя зарекомендовала.

«Голубая глина»(ТУ 5142-001-46893474-97)(Подушка,1999) хранилась в сухом виде, за сутки перед применением разводилась кипятком до консистенции жидкой сметаны. 300г сухой глины на 5л воды и затем обесклеивание в течении 35-45 мин.

Процент оплодотворения показывает, что более 1,5 на 1 ёмкость аппарата Вейса объёмом 30 литров загружать не рекомендуется. Если превысить цифру в 1,5 кг, процент оплотворения падает (таблица 4).

Другим возможным путем лишения икринок клейкости является химическая коагуляция гиалуроновой кислоты применением танина, который

кроме доступности и относительной дешевизны очень эффективен при невысоких концентрациях и малой экспозиции. При этом применение данного препарата требует осторожности и точности дозировки и времени обработки, т.к. может вызвать гибель икры. Также крайне важно при использовании танина избегать препарата с истёкшим сроком годности.


Таблица 4. Итоговые данные получения, оплодотворения и обесклеивания икры.

Количество самок260Количество самцов166Оплодотворённая икра, кг15,0Количество молок, мл150Количество икринок, шт1800000Количество аппаратов для обесклеивания, шт9Аппарат, №Вес загруженной икры, кг/штПроцент оплодотворения,%11,5/1800005121,8/2160003431,8/2160003541,5/1800005551,9/2280001661,7/2040004671,7/2040003881,5/1800005291,6,19200041

Из 1 800 000 шт икринок оплодотворилось и обесклеилось 720 000 шт, что составляет 40%.


4.3 Результаты инкубации икры стерляди


Обесклеенную икру размещали в инкубационные аппараты «Осётр». В аппарате «Осетр» инкубируемая икра закладывалась в изолированные ящики, из которых свободные эмбрионы по общему желобу попадали в личинкоприёмник и по мере его наполнения переносятся в бассейны. Норма загрузки стерляди в инкубационный аппарат «осётр» на один ящик - 200-250 тыс. шт.

В ходе инкубации для оценки рыбоводного качества икры, определялся процент оплодотворения и доля типично развивающихся эмбрионов.


Рисунок 17 - Повышение коэффициента оплодотворения методом отбора погибшей и повреждённой икры.


Для определения процента оплодотворения икру в аппарате перемешивали, брали пробу 200-300 икринок (рисунок 10) и подсчитывали долю нормально развивающихся эмбрионов в общем количестве икринок в пробе. Также по возможности повышали коэффициент оплодотворения, отбирая погибшую икру из рыбоводного аппарата. Время отбора проб определялось по графикам (Детлаф и др., 1981). Дальнейшее наблюдение за эмбриональным развитием включало определение процента нормально развивающихся эмбрионов. Во время инкубации икры, особенно на стадиях дробления и гаструляции избегали механических воздействий, в том числе тряски при переноске и отборе икры.

Интенсивность потребления кислорода в процессе эмбрионального развития увеличивалось. Содержание растворенного в воде кислорода не снижалось менее 7,5 мг/л. Концентрация ниже 6 мг/л (80% насыщения) приводит к различным отклонениям в развитии (гипертрофия сердца, водянка перикарда и др.), концентрация кислорода 3 -3,5 мг/л приводит к полной гибели эмбрионов. Одним из показателей нормального эмбрионального развития, характеризующих качество полученного потомства, являлась синхронность развития зародышей. В ходе нормального развития икры стадийный разброс развития не должен превышать более двух стадий в пробе (Детлаф и др.,1981).

Изменение темпов и синхронности эндогенного развития рыб может возникать вследствие повреждающего воздействия абиотических факторов. С повышением температуры наблюдалась десинхронизация развития, которая характеризуется большими стадийными различиями, приводящими к формированию различных уродств, значительному увеличению продолжительности выклева, проходящего без ярко выраженного пика (Вернидуб, 1951; Детлаф и др., 1981).

Подобные явления довольно часто наблюдаются при инкубации икры на рыбоводных заводах, где создание оптимальных условий обычно сопряжено со многими техническими трудностями. Управление температурным режимом инкубации икры позволяет избежать негативного воздействия изменений температуры за пределами оптимального интервала и создать наиболее благоприятные условия для развития эмбрионов, предотвращая этим также поражение их сапролегнией.

Оптимальная температура для развития икры стерляди 13-15 °С. Значительное отклонение от оптимальных температур как: в сторону повышения, так и понижения приводит к различным уродствам и гибели эмбрионов. Контроль над температурным режимом осуществлялся каждые 2 часа. Суточные колебания температуры воды не должны превышали 3 °С. Температурные показатели, ход и результаты инкубации регистрировали в журналах.

Особое внимание на этом этапе следует уделить появлению на мёртвой икре гифов разновидности плесневого грибка сапролегнии (Saprolegnia). Сущёствует несколько родов - грибы Achilla, Aphanomyces, Saprolegnia, вызывающих похожие симптомы заболевания у икры и молоди осетровых. Наиболее часто встречается именно грибы рода Saprolegnia. В зависимости от условий окраска грибка может быть белой и слабо-жёлтой. Имеют разветвляющиеся и неразветвляющиеся нитеобразные гифы, лишённые перегородок, толщина которых достигает 75 мкм. Гифы окружены оболочкой и заполнены протоплазмой, которая содержит большое количество ядер. Терминальная часть гифа расширена и образует оболочки с зооспорами. При созревании спор оболочка разрывается, и зооспоры выбрасываются во внешнюю среду. Эти грибы могут размножаться и половым путём. Гифы сначала образуются на мёртвой икре и если её вовремя из аппарата не извлекали, сапролегния переходила на здоровые икринки. Лечение: вовремя и периодически отбирали из аппаратных лотков мёртвые икринки и оболочки, а также погибших предличинок. Воду до начала выклева обрабатывали органическим красителем метиленовым синим. Концентрацию дозировали по литературным рекомендациям к применению метиленового синего. Над аппаратами ставили капельницы, чтобы поступление раствора было постоянным. Также хорошо зарекомендовал себя ветпрепарат для борьбы с грибковыми заболеваниями, применяющиеся для аквариумных рыб, Сера Микопур (Sera Mycopur). Также воду перед попаданием в аппараты можно стерилизовать ультрафиолетовым бактерицидным излучением с длинной волны 254 нанометра. Слой воды 1 см должен непрерывно обрабатываться 9 секунд с мощностью лампы из расчёта 18-24 ватта на кубометр.

Для борьбы с сапролегнией были использованы органический краситель метиленовый синий и ветеринарный препарат Сера Микопур.

,3 г метиленового синего разводилось в 50 мл воды. Это количество рассчитано для объема воды 100л, то есть по 5 мл данного раствора на каждые 10 л воды. В такой концентрации раствор устанавливался в капельнице над лотком с икрой. Экспозиция не более 2 часов.

Микопур дозировался исходя из инструкции к препарату.


Таблица 5 - Применение препаратов для борьбы с сапролегнией.

КонтрольМетиленовый синийМикопурЭкспозиция-2 часа2 часаВыход, %324865Расход мл/ч-15010

Из таблицы 5 следует, что целесообразно ставить капельницы с растворами в условиях систем оборотного водоснабжения. Ультрафиолет малоэффективен в таких условиях. Из плюсов метиленового синего - его доступность, цена, длительность хранения. Недостатки - канцерогенный эффект, подбор точной дозировки, при преждевременном выклеве может пострадать предличинка. Что касается микопура, то плюсы - малое количество препарата при дозировках (необходимо в 15 раз меньше, чем метиленового синего), не канцерогенен, не вредит предличинкам, гибкость в экспозициях - можно применять как единовременно, так и капельно. Из минусов - цена препарата выше метиленового, доступно только в ветаптеках и зоомагазинах.

стерлядь индустриальный молодь воспроизводство

Таблица 6 - Результат оплодотворения и инкубации икры стерляди.

Аппарат, №, колличество загруженной икры, штПроцент оплодотворения,%/ штВыход предличинок в %/шт1 18000051/9200085/790002 21600034/7300080/580003 21600035/7500081/610004 18000055/9900086/860005 22800016/3600077/280006 20400046/9400087/820007 20400038/7800085/660008 18000052/9400086/810009 19200041/7900075/59000Итого:180000040/72000083/600000

Из 720 000 заложенных икринок выклюнулось 600000, что составляет 83%.

.4 Выращивание молоди в бассейнах


Начало выклева характеризовалось появлением в инкубационном аппарате единичных плавающих предличинок. Постепенно их число увеличивалось и время, когда в аппарате появляется несколько сот предличинок, было началом массового выклева.

Выклюнувшихся предличинок переносили в пластиковые бассейны (ИЦА-2 или др.). Оптимальный слой воды - 20 см. Подсчёт предличинок вёлся визуально по эталону 500 шт. На следующий день после посадки предличинок в бассейнах производился отбор оболочек, мёртвой икры и уродливых особей. Отбирали погибшую икру и оболочки при помощи резинового сифона. В последующие дни количество погибших личинок подсчитывалось ежедневно и заносилось в рыбоводный журнал.


Рисунок 18 - Подсчёт предличинок эталонным методом.


Следует отметить важность оценки размеров желточного мешка при осуществлении рыбоводно-экологического мониторинга молоди, выращенной на осетровых заводах. Показателем деформации желточного мешка предличинок осетровых, являлось отношение его высоты к длине, составляющее в норме 0,55-0,69. Для деформированного (грушевидного или удлиненно-овального) желточного мешка данное отношение уменьшалось до 0,29-0,44. (Е.С. Беляева, 1983). В случае небольших размеров мешка (и значительной индивидуальной изменчивости его морфометрических показателей) эндогенные ресурсы не обеспечивают дальнейший рост и нормальное развитие на одном из наиболее важных этапов - переходе к экзогенному питанию. Вместе с тем, и излишне большой объем желтка на стадиях дифференцировки отделов пищеварительной системы негативно влияет на их формирование, приводя к задержке секреторной функции эпителия (Гербильский, 1957; Богданова, 1972).

Скорость утилизации желточной массы также связана с развитием молоди. Ускорение рассасывания желточного мешка (по сравнению с предшествующим этапом - пассивным залеганием на дне бассейнов) обусловлено началом активного плавания предличинок и ускорением процессов морфогенеза


Таблица 7 - Нормативы содержания молоди.

ПоказателиНормативПлощадь рыбоводных бассейнов, лотков, м24-6Плотность посадки, тыс. шт./м26-8Глубина воды в бассейне, см20Содержание кислорода мг/л7-9Освещённость, люкс40-80Расход воды, л/мин.8-14

При выдерживании предличинок в бассейнах, так же, как и в период инкубации икры, осуществляли постоянный контроль за температурным и кислородным режимом.

Следует отметить некоторые особенности поведения предличинок в первые дни жизни. После выклева предличинки рассеивались в толще воды и совершали так называемые «свечки»: периодически поднимались к поверхности воды и опускались на дно бассейна. При естественном нересте такое поведение предличинок осетровых позволяет им, во-первых, избежать заиливания, и, во-вторых, скатываясь по течению быстрее достигать зон богатых кормовыми организмами.


Таблица 8 -Плотность посадки молоди при бассейновом выращивании.

Масса рыбы, гТемпература воды,оСтыс. шт./м2тыс. шт./м30,04-0,0716-175-725-350,07-0,517-193-515-250,6-1,019-202,0101,1-3,020-221,02,53,1-5,022-240,5-0,80,7-1,05,1-30,024-260,2-0,250,25-0,30более 30,024-260,1-0,150,1-0,15

При переходе на жаберное дыхание и стадии формирования пищеварительной системы, так называемый период «роения», предличинки опускались на дно бассейна и образовали различного рода скопления («пятна»). В случае, если скопления личинок находятся в зонах с низким водоснабжением, возможна их гибель из-за недостатка кислорода (интенсивность потребления кислорода к этому периоду возрастает в несколько раз по сравнению с эмбриональным).

На этом этапе также возможна массовая гибель предличинок, которая может быть вызвана как рыбоводным качеством икры, так и неблагоприятными условиями выращивания.

По достижению этих стадий, предличинки, имеющие морфофизиологические дефекты и отклонения в развитии органов дыхания, пищеварения, ферментной системы уже не были способны к дальнейшему развитию и погибали. В связи с этим было необходимо каждые трое суток отбирать пробы в количестве 30-50 штук живых и погибших предличинок для наблюдения за развитием и оценкой качества предличинок.

Появление на дне бассейна единичных меланиновых пробок служило сигналом к началу первого кормления, которое осуществляют при выбросе меланиновой пробки у 2-3% личинок. Период выброса меланиновых пробок может длиться 3-4 суток, а несвоевременное внесение корма приводит к взаимному травмированию и гибели личинок. В частности стерлядь обкусывает плавники друг другу, у белуги же, например, в этом период наблюдаются случаи каннибализма.

Сроки перехода на активное питание зависят от температуры воды и ее химического состава. До возраста 10 суток оптимальные температуры выдерживания предличинок соответствуют оптимуму нереста: 13-17 ºС.

В период перехода на активное питание следует избегать резких колебаний температуры воды. Так, понижение температуры, несмотря на выброс меланиновых пробок, может вызвать у личинок отказ от корма, что объясняется замедлением процесса резорбции жира в пищеварительной системе (хорошо заметно при осмотре брюшной стороны личинок).

В качестве живого корма традиционно используют науплий артемии, дафнию, моину, или мелкорубленых олигохет. Суточная норма потребления живых кормов рассчитывалась в соответствии с планируемым приростом и кормовым коэффициентом потребляемых организмов (науплии артемии 2-4, дафнии - 6, олигохеты - 2). Для кормления подрощенной молоди можно использовать трубочник, при этом крупные личинки могут потреблять целых червей. Суточные дозы кормления варьируют от 20 до 30% от массы тела личинок.

Применение дафнии неоднозначно. С одной стороны это эффективный, доступный, лёгкий в культивации живой корм. Однако, как правило, культивируются дафнии в открытых водоёмах. Только так можно обеспечить достаточное количество дафнии для кормления молоди. Скармливая дафний из таких водоёмов молоди в бассейнах, существует риск занести инфекционное заболевание.

Кратность кормления по суточному рациону живыми кормами зависит от видовой специфики интенсивности переваривания кормовых объектов. Суточная норма дафнии составляла 40-50%. Дафнии или науплии артемий лучше всего разводить водой в определенном объеме, рассчитанном соответственно по количеству молоди в бассейне. Обычно при полноценном питании (качество и количество) личинки стерляди за 5-6 суток достигают массы 80-90 мг. В процессе подращивания контролировали плотности посадки и размерную структуру осетровых рыб в каждом бассейне, проводя вовремя сортировки.

Кормление искусственными кормами. Длительное использование только живых кормов может существенно осложнить последующий переход молоди на искусственные корма (облегчить такой переход может одновременное использование нескольких видов живых кормов). Поэтому применяли пылеобразные фракции искусственных кормов сразу при переходе на активное питание с постепенным повышением их доли в общем рационе.

Суточные нормы кормления комбинированными кормами рассчитывали на период 5-10 дней (в зависимости от возраста рыбы) с учетом температуры воды, средней массы молоди и ее количества. Определение средней массы производили один раз в трое суток, начиная с момента перехода на активное питание. Численность рыбы определялась с учетом погибшей. Кроме этого, в зависимости от массы молоди подбирали фракцию (размер крупки) стартовых кормов. Для кормления молоди осетровых рыб можно использовать корма отечественного и импортного производства с содержанием белка не менее 48-55% и жира 8-12%. Наиболее эффективны сбалансированные полноценные корма отечественные корма производства НТЦ «Аквакорм» - ОСТ-4, ОСТ-6, а также фирм производителей «Крафт» (Германия), «Биомар» (Дания), Аллер Аква (Польшп). Рецептуру, рекомендации, кормовые коэффициенты и периодичность кормления производитель указывает в сопровождающих корм документах.

В процессе подращивания контролировали плотности посадки и размерную структуру осетровых рыб в каждом бассейне. При достижении массы 0,2-0,3 г, каждые 7 дней проводили сортировку молоди, выделяя три размерные группы: крупную, среднюю и мелкую. Необходимость сортировки объясняется пищевой конкуренцией при интенсивном росте молоди и невозможностью точного определения количества задаваемого корма в случае, если масса молоди в одном бассейне различаются более чем на 50%.

В период кормления искусственными кормами молоди осетровых обеспечивали чистоту бассейнов и не допускали накопления остатков корма. Чистили бассейны после каждого кормления. Личинка и молодь имела не более 15 минут доступа к корму, После того, как истекали 15 минут, резко повышался сброс воды из бассейна, унося с собой остатки несъеденного корма и экскременты рыб.

Следует отметить важность своевременной замены фильтрующих решеток на стоке воды из бассейнов. По мере роста личинок, ячейка сливного экрана на «фонарях», «стаканах» должна увеличиваться от 1мм при выдерживании предличинок, до 2мм при переходе на активное питание и далее постепенно до 7мм при выращивании молоди до 10г.

Во время кормления личинок были использованы как живые корма (дафния, науплии артемий) так и искусственные (Аллер Аква). В начале кормления первую неделю в один бассейн вносились 50% живых кормов и 50% искусственных (опытная группа), в остальные же 80% Аллер Аква и 20% живых кормов (контрольная группа). В результате темп роста у молоди, питавшейся 50% живыми кормами, был заметно выше (рисунок) - на 35 день опытная группа имела навеску м, тогда как контроль был весом в среднем 680 мг. Однако последующий отход из-за отказа опытной группы от питания полностью искусственным кормом нивелировал это достижение. Отход опытной группы составил более 80%. Опыт на этом был прекращён.

Из выклюнувшихся 600 000 шт предличинок, на активное питание перешли 480 000 шт (80%), а навески более 3 г достигло всего 410 000 шт (68%).


Таблица 9 -Нормы кормления и рационы.

Дни714212835Опыт и контрольОКОКОКОКОКСредняя масса, мг227570180160340310750680Яйца науплий, %50205020701080000Аллер аква, %50805080309020100100100Суточная доза от массы, %201510108Таблица 10 - Количество молоди стерляди по мере развития.

Закладка икры, шт/%1 800 000/100Оплодотворение, шт/%720 000/40Выклев, шт/%600 000/83Переход на активное питание шт/%480 000/80Молодь массой 3 г шт/%410 000/85

Как видно из таблицы 10, из 1800000 полученных икринок только 410000 развились до массы 3 г, что составляет 23%. Это удовлетворительный результат.


ВЫВОДЫ И РЕКОМЕНДАЦИИ


В дипломной работе была исследована биотехника воспроизводства стерляди в условиях индустриальной аквакультуры. Был дан литературный обзор по рассматриваемому виду осетровых. Описаны процессы выдерживания и инъецирования производителей, обесклеивания, инкубирования, подращивания и кормления предличинки. Приведены соотношения выхода 3 граммовой молоди из заложенной икры.

1. Темп роста стерляди, разогнанной на 50% кормлении живыми кормами выше чем у молоди, которую кормили по традиционной технологии, но в дальнейшем происходит отход практически всей группы, питавшейся по рациону с 50% живыми кормами - на 35 день кормления разница между опытом и контролем была 70мг(10%). Отход более 80%, что показывает нецелесообразность кормления по рациону с повышенным процентом живых кормов.

Инъекции сурфагона для производителей стерляди нерациональны, так как требуют дополнительного выдерживания и не позволяют использовать икру в качестве материала для воспроизводства. Ни одна из самок стерляди, инъецированных сурфагоном не созрела вовремя.

. Для обесклеивания использовать чистую свежедобытую «голубую глину». Или освоить технику обесклеивания икры танином.

. Использовали для борьбы с сапролегнией капельницы с растворами ветпрепаратов либо органические красители. По возможности можно использовать систему УЗВ вместо СОВ при инкубировании - это позволит обрабатывать воду УФ-излучением, регулировать химические и температурные параметры воды.

. Кормление стерляди рационально начинать с живых кормов, постепенно переводя на искусственные. Соотношением 10% живых кормов к 90% искусственных.

ЛИТЕРАТУРА


1.Ананьев В.И., Чебанов М.С., Манохина М.С., Шевцова Э.Е. Рабочая встреча по материалам Международной конференции «Сохранение генетического разнообразия рыб » (г. Ванкувер, Канада, 1998). «Действия до исчезновения». - Рыбное хозяйство. Серия Аквакультура, Вып. 1. - М.: ВНИиПKИЭИиАСУ, 1999. С. 45-51.

.Артюхин Е. Н. Осетровые (экология, географическое распространение и филогения). С-ПБ.: Изд-во С.-Пб. ун-та, 2008. 137 с. + вкл.

.Атлас нарушений в гаметогенезе и строении молоди осетровых. Акимова Н. В., Горюнова В. Б., Микодина Е. В., Никольская М. П., Рубан Г. И., Соколова С. А., Шагаева И. Г., Шатуновский М. И. М., Изд-во ВНИРО. 2004. 120 с.

.Березовская В.И., Савельева Э.А., Чебанов М.С., Шепиленко Н.Д., Реусов М.П., Чёлушкин Г.А. Нерестовый комплекс для воспроизводства реофильных рыб//Авторское свидетельство № 1755752.-Б.И. № 31, 1992. 12с.

.Березовская В. И., Савельева Э. А., Чебанов М. С. Реакклиматизация стерляди и шипа в бассейне реки Кубань // II Межд. симпозиум. "Ресурсосберегающие технологии в аквакультуре". Краснодар, 1999. С. 16-18.

6.Бойко Н. Е. Григорьян Р. А., Чихачёв А. С. Обонятельный импринтинг молоди осетра Acipenser gueldenstaedtii // Ж. эвол. биохим. и физиол. - 1993. Т. 29 - №5-6. С. 509-514.

.Бойко Н. Е. Физиологические механизмы адаптивных функций в раннем онтогенезе русского осетра Acipenser gueldenstaedtii Brandt. Автореф.

дис. на соиск. уч. степ. д.б.н.: С-Пб., 2008. 31 с.

.Бойко Н. Е., Григорьян Р. А. Влияние тиреоидных гормонов на запечатление химических сигналов в раннем онтогенезе осетра Acipenser gueldenstaedtii Brandt // Ж. эвол. биохим. и физиол. 2002. Т. 38 - №2. С. 169-172.

9.Галич Е. В. Эколого-морфологические особенности развития осетровых рыб р. Кубань в раннем онтогенезе при управлении сезонностью их размножения. Автореф. дис. канд. биол. наук. Краснодар, 2000. 19 с.

.Казанский Б. Н. Закономерности гаметогенеза и экологическая пластичность размножения рыб // Экологическая пластичность половых циклов и размножения рыб. Л., 1975. С.3-32.

.Карнаухов Г. И., Чебанов М. С., Василиади В. Д. Генетические подходы при формировании коллекционного маточного стада стерляди // Генетика, селекция и воспроизводство рыб. С-Пб., 2002. С. 80-83.

.Кокоза А. А. Искусственное воспроизводство осетровых рыб //Астрахань, 2004. 208 с.

.Константинов А. С., Зданович В. В., Пушкарь В. Я., Речинский В. В., Костоева Т. Н. Рост и энергетика молоди стерляди в оптимальном стационарном терморежиме и при плавании в термоградиентном пространстве в зависимости от накормленности рыб // Вопр. ихтиологии. 2005. Т. 45. №6. С. 831-836.

.Краснодембская К.Д. Методические указания к оценке физиологической полноценности личинок костистых и осетровых рыб, выращиваемых на рыбоводных заводах, по реакциям пигментных клеток (меланофоров) С-Пб., 1994. 39 с.

.Легеза М. И. О помесях каспийских осетровых // Осетровые СССР и их воспроизводство. М., «Пищевая промышленность», 1971. С. 196-206.

.Николюкин Н. И. Межвидовая гибридизация рыб. Саратов. «Саратовское областное государственное издательство», 1952. 312 с.

.Никоноров С. И., Витвицкая Л. В. Эколого-генетические проблемы искусственного воспроизводства осетровых и лососевых рыб. М., Наука, 1993.

.Подушка С. Б., Левин А. В. Использование аномалий обонятельного органа в качестве маркера выпускаемой рыбоводными заводами молоди осетровых // Проблемы и перспективы рыбоводства и рыболовства в Пермской области // Тр. ГосНИОРХ. 1988. Вып. 281. С. 132-137.

.Савушкина С.И. Воспроизводство осетровых рыб с использованием криоконсервированной спермы // Рыбное хозяйство. Серия Аквакультура, Вып. 1. - М.: ВНИиПKИЭИиАСУ, 1999. С. 39-43.

.Тихомиров А. М., Никоноров С. И. Пути повышения экологической адекватности технологии искусственного воспроизводства осетровых // Международная конференция «Осетровые на рубеже 21 века»: Тезисы докладов. Астрахань: Изд-во КаспНИРХа, 2000. С. 275-277.

.Трувеллер К.А. Генетический мониторинг в мероприятиях по сохранению и использованию генофонда осетровых рыб // Рыбное хозяйство. Серия Аквакультура, Вып. 1. - М.: ВНИиПKИЭИиАСУ, 1999. С. 9-16.

.Чебанов М.С. Осетровые в аквакультуре: перспективы ресурсосберегающих технологий // Ресурсосберегающие технологии в аквакультуре. Краснодар, 1996. С. 102-103.

.Чебанов М. С. Экологические основы оптимизации воспроизводства осетровых рыб // Рыбоводство и рыболовство. 1996. № 2. С. 9-12.

.Чебанов М. С. Формирование генетической коллекции осетровых рыб в Южном филиале ФГУП «ФСГЦР» // Генетика, селекция и воспроизводство рыб. Докл. 1-ой Всерос. конф. С.П-б. ФГУП «ФСГЦР». 2002. С. 73-80

.Чебанов М. С., Галич Е. В. Ультразвуковая диагностика рыб. Краснодар, «Просвещение-Юг», 2010. 135 с.

.Чебанов М.С., Галич Е. В., Чмырь Ю.Н. Руководство по разведению и выращиванию осетровых рыб. М., ФГНУ «Росинформагротех», 2004. 136 с.

.Чебанов. М. С., Галич Е. В., Меркулов Я. Г. Формирование и эксплуатация ремонтно-маточных стад осетровых рыб южного филиала Федерального селекционно-генетического центра рыбоводства // Породы и одомашненные рыбы формы осетровых рыб (Acipenseridae). М., ООО «Столичная типография», 2008. С. 52-85.

.Чебанов М. С., Козырицкая Ю. Е. 229. Белуга. // Красная Книга Краснодарского края (животные) / Адм. Краснодарского края: (науч. ред. А. С. Замотайлов). - Изд. 2-е. Краснодар: Центр развития ПТР Краснодар. края, 2007. С. 315-316.

.Чебанов М. С., Козырицкая Ю. Е. 230. Шип. // Красная Книга Краснодарского края (животные) / Адм. Краснодарского края: (науч. ред. А. С. Замотайлов). - Изд. 2-е. Краснодар: Центр развития ПТР Краснодар. края, 2007. С. 316-317.

.Чебанов М. С., Козырицкая Ю. Е. 231. Стерлядь. // Красная Книга Краснодарского края (животные) / Адм. Краснодарского края: (науч. ред. А. С. Замотайлов). - Изд. 2-е. Краснодар: Центр развития ПТР Краснодар. края, 2007. С. 317-318

31.Чебанов М. С., Савельева Э. А. Биотехнология воспроизводства осетровых рыб на основе полициклического использования мощностей рыбоводных заводов в современных экологических условиях. Краснодар, 1996. 24 с.

32.Чебанов М. С., Чмырь Ю. Н. Новые методы оптимизации осетроводства // Рыбоводство и рыболовство. 2002. № 1. С. 20-21.


Министерство образования и науки Российской Федерации Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТ

Больше работ по теме:

КОНТАКТНЫЙ EMAIL: [email protected]

Скачать реферат © 2017 | Пользовательское соглашение

Скачать      Реферат

ПРОФЕССИОНАЛЬНАЯ ПОМОЩЬ СТУДЕНТАМ